在用尼康顯微鏡觀察標本之前，必須首先對顯徽鏡進行一些調節和預備操作，這些調節主要包括照明器、鏡筒、視場光闌和集光器的調節。
奧林巴斯顯微鏡

    照明器的調節。首先接通電源，打開調壓變壓器使工作電壓在燈泡所標電壓的范圍之內，然后根據所用顯微鏡燈的類型調中。調節的方法是把一個刻有幾個同心圓環的場玻璃圓盤放在視場光闌處，調節燈聚光器使燈絲的像和燈絲的反射像聚焦在場玻璃圓盤上，并且通過燈室上的燈來調節螺旋和反光鏡調節螺旋，把燈絲的像和燈絲的反射像*移到圓盤的*并處于并排相對的位置，這時燈就處于均勻的照明狀態。

    尼康顯微鏡鏡筒的調節。首先把有標本的載玻片用片夾固定在載物臺上，選擇一個中等放大倍數的物鏡用來進行聚焦。把集光器上升到zui高位置，并打開孔徑光闌和視場光闌。然后用推或拉的方法調節兩個目鏡之間的距離。在兩個目鏡上同時用兩只眼睛觀察使得兩個圓形的視場正好*重合，這時雙目鏡筒刻度盤上所讀出的數字，就是觀察者兩眼瞳孔之間的距離（以毫米為單位）。這個距離對于同一個觀察者來說是固定不變的，因此記下這個讀數，在再次觀察時可以直接從刻度盤上調節到這個距離。對于有缺陷的視力還可以通過調節目鏡螺旋進行矯正，矯正的方法是:先用右眼通過左邊的目鏡觀察標本并用細調旋鈕聚焦;然后用左眼通過左邊的目鏡觀察已聚焦的同一標本，如果觀察者視力正常，用左眼所看到的物像仍然是清晰的;如果觀察者視力有缺陷，這個物像就不清晰，這時應轉動左邊目鏡上的聚焦螺旋（注意決不能轉動細調旋鈕）再次聚焦標本使之*清晰為止，此后在尼康顯微鏡的使用過程中再不能隨意轉動目鏡聚焦螺旋。

    集光器的調中和視場光闌的調節。這種調節是根據柯勒照明原理進行的，因此一般被稱為柯勒照明法。它對于尼康顯微鏡的使用是非常重要的，其步驟是:

（ 1）關閉視場光闌，這時在視場中可以看到一個邊緣模糊的圓形或多邊形亮斑   

（2）旋轉集光器垂直調節旋鈕，逐漸降低集光器直到圓形或多邊形亮斑（實際上是視場光闌的像）的邊緣*清晰。

（ 3 ）調節集光器上的兩個調中螺旋，把視場光闌的像調到視場的*。

（ 4）逐漸打開視場光闌，使得視場光闌像的邊緣剛好消失在視場之外。

    在這里順便談一下視場光閡和孔徑光閡的功能及其調節的依據。

    視場光闌的作用是控制標本照明區域的大小，阻止對于像的形成所不需要的光線進入標本，從而保護標本以免過熱受損。因此視場光闌的大小以開到正好使被觀察的物場*照明為宜，當更換不同放大倍數的物鏡時，由于物場大小發生變化，就要重新調節視場光闌，但并不需要重新調中集光器。

    孔徑光闌是決定尼康顯微鏡成像的分辨力和反差的重要光學部件之一。孔徑光闌的大小是根據所用物鏡的孔徑來決定的，當集光器的孔徑稍低于物鏡的孔徑，即物鏡孔徑的70%被光線充滿時，能夠達到的光學效果。因此當更換不同數值孔徑的物鏡時，就要根據物鏡數值孔徑的70%計算值，及時地調節集光器的孔徑光闌。還必須注意的是:像的亮度決不能用孔徑光闌來調節，而只能用調節變壓器或使用中密度濾光片來調節。